原則葉綠素廣泛存在于水果、蔬菜等綠色植物組織中,在植物細(xì)胞中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成葉綠體。植物細(xì)胞死亡時(shí),葉綠素是游離的,游離的葉綠素很不穩(wěn)定,對光熱敏感;在酸性條件下,葉綠素產(chǎn)生綠褐色的脫鎂葉綠素,脫鎂葉綠素在稀酸堿液中水解成亮綠色的葉綠素以及葉綠醇和甲醇。高等植物中的葉綠素有兩種:葉綠素a和b,均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。葉綠素含量的測定方法很多,主要有:1、原子吸收光譜法:通過測定鎂的含量,進(jìn)而間接計(jì)算出葉綠素的含量。2、分光光度法:用分光光度計(jì)測定葉綠素提取物在最大吸收波長處的吸光度值,利用朗伯-比爾定律計(jì)算提取物中各色素的含量。葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有最大吸收,兩條吸收曲線在652nm處相交。因此,測定提取物在645nm、663nm、652nm波長處的吸光度,根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式分別計(jì)算出葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素的含量。材料和儀器植物材料96%乙醇丙酮石英砂碳酸鈣粉分光光度計(jì)電子頂載天平砂漿棕色容量瓶定量濾紙吸水紙擦拭紙滴管漏斗步驟1、取新鮮植物葉子(或其他綠色組織)或干燥材料,擦去組織表面的污垢,去除中脈,切塊。稱取剛切碎的樣品2g,放入研缽中,加入少量石英砂、碳酸鈣粉和3mL95%乙醇,研磨成均質(zhì)漿液,加入10mL乙醇,繼續(xù)研磨直到組織變白。靜置 3-5 分鐘。2、取一張濾紙置于漏斗中,用乙醇潤濕,將提取物沿玻璃棒倒入漏斗中,濾液流入100mL棕色容量瓶中;用少量乙醇沖洗研缽和研杵及殘?jiān)鼣?shù)次,最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?br/>3、用滴管吸乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直到濾紙上沒有綠色和殘留物為止。最后,用乙醇稀釋至100mL,搖勻。4、取葉綠體色素提取物分別在665nm、645nm和652nm波長處測定吸光度,以95%乙醇為空白對照。防范措施1、光照對葉綠素有破壞作用。實(shí)驗(yàn)應(yīng)在弱光下進(jìn)行,研磨時(shí)間盡量短。2、如果色素提取液中混有其他物質(zhì)引起混濁,會(huì)影響吸光度的測定,應(yīng)重新過濾或離心。3、測量色素的吸光度前,應(yīng)根據(jù)儀器說明書和標(biāo)準(zhǔn)葉綠素a、b校準(zhǔn)分光光度計(jì)的波長,否則會(huì)影響葉綠素含量的測量精度。常見問題1、無水乙醇提取時(shí)間較長,對某些物質(zhì)尤其是木本植物的葉綠素提取不夠完全。無水丙酮萃取會(huì)出現(xiàn)渾濁,影響比色測定。因此,提取葉綠素最好選擇丙酮和無水乙醇,比例為2:1效果更佳。2、傳統(tǒng)的80%丙酮法由于含水量高,提取速度慢,測定值低,葉綠素穩(wěn)定性差,應(yīng)慎用。原則葉綠素廣泛存在于水果、蔬菜等綠色植物組織中,在植物細(xì)胞中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成葉綠體。植物細(xì)胞死亡時(shí),葉綠素是游離的,游離的葉綠素很不穩(wěn)定,對光熱敏感;在酸性條件下,葉綠素產(chǎn)生綠褐色的脫鎂葉綠素,脫鎂葉綠素在稀酸堿液中水解成亮綠色的葉綠素以及葉綠醇和甲醇。高等植物中的葉綠素有兩種:葉綠素a和b,均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
提取葉綠素提取的準(zhǔn)備工作在室溫為 25°C 的半暗室中進(jìn)行。提取步驟如下:(1)取1000克新鮮綠葉,放入韋伯斯特?cái)嚢铏C(jī)中粉碎。(2)將1000克壓碎的綠葉提取到加入少量碳酸鈣的丙酮(溫度20℃)中,直至過濾和洗滌的葉碎片無色。
葉綠素是植物光合作用的重要參與者。葉綠素的變化也反映了植物養(yǎng)分的豐富程度,或者是否受到外界的干擾。事實(shí)上,這在農(nóng)業(yè)中得到了很好的應(yīng)用。研究人員經(jīng)常對作物進(jìn)行營養(yǎng)診斷,試圖通過研究作物葉綠素打開提高作物質(zhì)量和產(chǎn)量的大門。
葉綠素廣泛存在于水果、蔬菜等綠色植物組織中,與植物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)結(jié)合形成葉綠體。當(dāng)植物細(xì)胞死亡時(shí),葉綠素就會(huì)釋放出來。游離葉綠素非常不穩(wěn)定,對光和熱敏感。在酸性條件下,葉綠素形成綠褐色脫鎂葉綠素,在稀堿液中可水解成鮮綠色的葉綠素。酸式鹽以及植醇和甲醇。高等植物中的葉綠素有兩種:葉綠素a和b,均易溶于乙醇、丙酮和氯仿。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素,可分為a、b、c、d四類。葉綠素不溶于水,但溶于有機(jī)溶劑,如乙醇、丙酮、氯仿等;葉綠素不是很穩(wěn)定,會(huì)被光、酸、堿、氧氣、氧化劑等分解;葉綠素a的分子式C55H72O5N4Mg,在酸性條件下,葉綠素a分子容易失去卟啉環(huán)中的鎂而成為脫鎂葉綠素;葉綠素a存在于所有浮游植物中,約占有機(jī)干重的1%~2%。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素。葉綠素有四種常見類型 a、b、c 和 d。其中,葉綠素a是唯一能將光合作用的光能傳遞給化學(xué)反應(yīng)體系的色素。 c、d等吸收的光能全部通過葉綠素a傳遞到化學(xué)反應(yīng)體系。通過測量葉綠素a,可以掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力,了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的存在量。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)葉綠素a的質(zhì)量濃度上升到10 mg/m3以上并有快速上升的趨勢時(shí),可以預(yù)測水體將發(fā)生富營養(yǎng)化。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素,可分為a、b、c、d四類。葉綠素不溶于水,但溶于有機(jī)溶劑,如乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等;葉綠素不是很穩(wěn)定,會(huì)被光、酸、堿、氧氣、氧化劑等分解;葉綠素a分子式為C55H72O5N4Mg,在酸性條件下,葉綠素a分子容易失去卟啉環(huán)中的鎂而成為脫鎂葉綠素。