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葉綠素提取的準(zhǔn)備工作在室溫為 25°C 的半暗室中進(jìn)行。提取步驟如下:(1)取1000克新鮮綠葉,放入韋伯斯特?cái)嚢铏C(jī)中粉碎。(2)將1000克壓碎的綠葉提取到加入少量碳酸鈣的丙酮(溫度20℃)中,直至過濾和洗滌的葉碎片無(wú)色。(3) 將過濾后的丙酮提取液放入盛有1L石油醚和100mL丙酮的漏斗中,加入蒸餾水輕輕搖動(dòng)直至分層。棄去水層中的大部分丙酮和水溶性雜質(zhì),只剩下石油醚溶液。(4)石油醚溶液再次用蒸餾水純化后,用含石油醚和0.01g草酸的200mL 80%甲醇溶液洗滌5次以上,最后得到黃綠色懸浮液。(5)將懸浮液用無(wú)水硫酸鈉干燥,浸潤(rùn)于3cm厚的蔗糖粉制成的柱子中,然后用石油醚洗滌沉淀的色素,除去類胡蘿卜素,使其僅含天然葉綠素。(6) 含有天然葉綠素的蔗糖柱分為兩層,綠色層有4-10mm的葉綠素b層,另一層藍(lán)色層有2-6mm的葉綠素a層。(7) 將位于藍(lán)層中間的部分(約一半藍(lán)層)放入乙醚中,過濾懸浮液,洗脫,用蒸餾水洗滌,用硫酸鈉干燥,然后用容器過濾后,葉綠素得到一個(gè)。(8)將(6)中綠色層中間部分去掉,迅速放入乙醚中過濾洗脫,制成葉綠素b乙醚溶液。分離:色譜法是分離、純化和鑒定有機(jī)化合物,尤其是痕量分析的重要方法。果蔬中的色素主要有脂溶性胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素和水溶性花青素。在提取實(shí)驗(yàn)中,我們可以利用相似混溶原理過濾掉水溶性花青素,然后利用薄層色譜、柱色譜、高效液相色譜分離胡蘿卜素、葉黃素和葉綠素。顏料的極性依次減弱,可適當(dāng)選擇單一有機(jī)溶劑或不同比例的混合溶劑作為展開溶劑和洗脫液,以確定最佳的優(yōu)化分離條件。
原則葉綠素廣泛存在于水果、蔬菜等綠色植物組織中,在植物細(xì)胞中與蛋白質(zhì)結(jié)合形成葉綠體。植物細(xì)胞死亡時(shí),葉綠素是游離的,游離的葉綠素很不穩(wěn)定,對(duì)光熱敏感;在酸性條件下,葉綠素產(chǎn)生綠褐色的脫鎂葉綠素,脫鎂葉綠素在稀酸堿液中水解成亮綠色的葉綠素以及葉綠醇和甲醇。高等植物中的葉綠素有兩種:葉綠素a和b,均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
葉綠素是植物光合作用的重要參與者。葉綠素的變化也反映了植物養(yǎng)分的豐富程度,或者是否受到外界的干擾。事實(shí)上,這在農(nóng)業(yè)中得到了很好的應(yīng)用。研究人員經(jīng)常對(duì)作物進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)診斷,試圖通過研究作物葉綠素打開提高作物質(zhì)量和產(chǎn)量的大門。
葉綠素廣泛存在于水果、蔬菜等綠色植物組織中,與植物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)結(jié)合形成葉綠體。當(dāng)植物細(xì)胞死亡時(shí),葉綠素就會(huì)釋放出來。游離葉綠素非常不穩(wěn)定,對(duì)光和熱敏感。在酸性條件下,葉綠素形成綠褐色脫鎂葉綠素,在稀堿液中可水解成鮮綠色的葉綠素。酸式鹽以及植醇和甲醇。高等植物中的葉綠素有兩種:葉綠素a和b,均易溶于乙醇、丙酮和氯仿。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素,可分為a、b、c、d四類。葉綠素不溶于水,但溶于有機(jī)溶劑,如乙醇、丙酮、氯仿等;葉綠素不是很穩(wěn)定,會(huì)被光、酸、堿、氧氣、氧化劑等分解;葉綠素a的分子式C55H72O5N4Mg,在酸性條件下,葉綠素a分子容易失去卟啉環(huán)中的鎂而成為脫鎂葉綠素;葉綠素a存在于所有浮游植物中,約占有機(jī)干重的1%~2%。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素。葉綠素有四種常見類型 a、b、c 和 d。其中,葉綠素a是唯一能將光合作用的光能傳遞給化學(xué)反應(yīng)體系的色素。 c、d等吸收的光能全部通過葉綠素a傳遞到化學(xué)反應(yīng)體系。通過測(cè)量葉綠素a,可以掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力,了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的存在量。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)葉綠素a的質(zhì)量濃度上升到10 mg/m3以上并有快速上升的趨勢(shì)時(shí),可以預(yù)測(cè)水體將發(fā)生富營(yíng)養(yǎng)化。
葉綠素是植物光合作用中重要的光合色素,可分為a、b、c、d四類。葉綠素不溶于水,但溶于有機(jī)溶劑,如乙醇、丙酮、乙醚、氯仿等;葉綠素不是很穩(wěn)定,會(huì)被光、酸、堿、氧氣、氧化劑等分解;葉綠素a分子式為C55H72O5N4Mg,在酸性條件下,葉綠素a分子容易失去卟啉環(huán)中的鎂而成為脫鎂葉綠素。